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IMMUNOSENSORI PIEZOELETTRICI

La microbilancia al quarzo µLibra utilizza come trasduttori cristalli del tipo AT-cut con frequenza fondamentale di 10 MHz. La superficie del trasduttore è coperta da un sottile strato di oro che rappresenta l’elettrodo.

Sopra gli elettrodi in oro è possibile legare bio-molecole, come ad esempio gli anticorpi, sia per adsorbimento diretto, che per legame covalente ad un monostrato di acidi tiocarbossilici ottenuti mediante auto-assemblaggio (SAM), oppure utilizzando l’interazione mediata da amminosilani (APTES, GOPS) con o senza cross-linker. Inoltre, sfruttando il legame altamente specifico fra streptavidina (immobilizzata sull’elettrodo) e biotina (coniugata all’anticorpo) si ottiene un complesso molto stabile.

I saggi immunologici su QCM possono in principio essere effettuati con molecole label-free ossia non modificate in seguito a marcatura, in quanto la rilevazione dell’avvenuto legame si basa sulla misura della massa adsorbita sulla superficie del quarzo che determina una variazione della frequenza di oscillazione nominale del quarzo. Tuttavia, per aumentare la sensibilità del metodo, gli immunodosaggi possono essere basati su un formato a sandwich. In questi casi il segnale può essere amplificato ulteriormente con l’uso di un anticorpo secondario coniugato con particelle di oro colloidale.



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IMMUNOSENSORI ELETTROCHIMICI

La rivelazione elettrochimica negli immunodosaggi non è molto diffusa ma sta guadagnando un interesse sempre crescente in vista delle possibilità di produzione di elettrodi miniaturizzati e a basso costo. Questi possono essere prodotti con materiali economici e su larga scala utilizzando la tecnica della serigrafia con inchiostri a base di grafite o altri materiali conduttivi.

Possono essere adottate diverse tecniche elettrochimiche per la rilevazione del legame antigene anticorpo, a seconda del tipo di marcatore usato (substrati enzimatici che producono specie elettroattive oppure oro colloidale).

Il metodo di rivelazione è rappresentato dalla voltammetria ciclica a impulsi differenziali (DPV), che è un’analisi effettuabile sui comuni potenziostati commerciali. L’utilizzo di elettrodi serigrafati e la possibilità di effettuare le misure in flusso consentono di ridurre il volume di reazione con notevole ottimizzazione nell’utilizzo di reagenti e campioni preziosi.


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